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離心管的離心作用原理

更新時間:2020-11-19點擊次數(shù):2890
   離心管是實驗室里面常見的一種實驗耗材,主要是配合離心機用的。即將實驗液體裝在其中,然后放在離心機里面離心。 它是一種利用離心技術(shù),用于生物樣品的分離和制備的管狀試樣容器。通過離心機高速旋轉(zhuǎn)提供的巨大離心力,使液體中的微小顆粒沉降,從而和溶液分離。其由高質(zhì)量的透明高分子材料聚丙烯制成,廣泛應(yīng)用于多種試驗操作,滿足生物分析級要求。
  離心管的離心作用原理:
  當一個粒子(生物大分子或細胞器)在高速旋轉(zhuǎn)下受到離心力作用時,此離心力“F”由下式定義,即:F=ma =mω2 ra—粒子旋轉(zhuǎn)的加速度,m—沉降粒子的有效質(zhì)量,ω—粒子旋轉(zhuǎn)的角速度,r—粒子的旋轉(zhuǎn)半徑(cm)。通常離心力常用地球引力的倍數(shù)來表示,因而稱為相對離心力“RCF”?;蛘哂脭?shù)字乘“g”來表示,例如25000×g,則表示相對離心力為25000。
  離心管應(yīng)用:
  *生物樣品濃縮:包括抗原、抗體、酶、核酸或微生物
  *組織培養(yǎng)提取物或細胞裂解液中大分子組分的純化
  *對稀釋或從柱洗脫液預(yù)先純化的蛋白質(zhì)進行濃縮
  *脫鹽和緩沖液更換
  超濾離心管使用方法和注意事項:
  1、選擇合適的超濾離心管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾離心管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾離心管。
  2、新買來的超濾是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量*過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾離心管需要插在冰上預(yù)冷。
  3、質(zhì)量和重心二者都要達到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預(yù)冷至4度)。不同離心機的轉(zhuǎn)速rpm換算成g之后,有所不同。離心機的加速度調(diào)至低檔,減小對膜的壓力。注意,一定要等離心機達到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開離心機,否則離心機出問題時,無法抓緊時間處理,后果不可預(yù)測!

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